消减杂交(subtractive hybridization,扣除杂交) 是差别杂交的改进,用过量的参照细胞的mRNA 或CDNA 与目的细胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 杂交,形成的RNA CDNA 杂交体是两种细胞共有的,将其扣除。剩下的CDNA 或mRNA 可以标记成消减探针,并从CDNA文库中筛选目的克隆,可构建消减文库(subtractive libiary)。
消减杂交(subtractive hybridization,扣除杂交) 是指利用不同组织、细胞或不同状态下组织、细胞基因表达的差异性,并结合核酸杂交建立的克隆差异表达基因的技术。是差别杂交的改进,用过量的参照细胞的mRNA 或CDNA 与目的细胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 杂交,形成的RNA CDNA 杂交体是两种细胞共有的,将其扣除。剩下的CDN...
消减杂交法的原理是:将两个不同来源的基因组DNA、mRNA或反转录得到的cDNA,均使之成为单链分子后,彼此混合,同源区段之间就可复性成为双链杂合分子。一个来源中特有的基因,特有的基因转录物和由此得到的cDNA,就只能自身复性。通过适当的实验方法,设法把这些基因或基因转录物分离出来,这样就可以克隆基因,或鉴别在细胞...
SSH 即抑制消减杂交技术是由Diatchenko 等于1996 年以m RNA 差别显示技术为基础建立起来的筛选未知差异表达基因的新技术。它主要基于最近出现的抑制PCR , 并结合标准化(normalization 或equalization ) 和消减杂交( substractive hybridization)。抑制PCR 通过利用含引物序列的双链接头(adaptor) 充当引物模板, 使两端接上...
一般是将一种细胞的互补DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)与第二种细胞cDNA或mRNA相互杂交,其不被杂交的部分就代表了两种细胞基因表达的差异,可用于差异表达基因的克隆。差示筛选、消减探针、消减文库的建立等都是该技术的具体实施。
抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH) 是建立在抑制PCR 与消运用杂交二级动力学原理，减杂交技术相结合的基础上的更简单快速的分离差异基因的方法。即丰度高的单链DNA 在退火时产生同源杂交的速度快于丰度低的单链DNA，使原来在丰度上有差别的单链DNA 相对含量达到基本一致，利用链内退火优于链间...
阻抑消减杂交是2008年公布的生物化学与分子生物学名词。定义 将阻抑性聚合酶链反应与消减杂交相结合的实验方法，能有效地扩增低丰度的差异基因表达序列。一般是将目标互补DNA(cDNA)5′端分别加上两种人工接头，用过量的驱动DNA进行两次杂交，得到两个5′端有不同接头、不与驱动DNA杂交的目标cDNA，然后用与两种人工接头...
规范用词消减杂交 英文翻译subtracting hybridization 名词定义利用不同组织、细胞或不同状态下组织、细胞基因表达的差异性,并结合核酸杂交建立的克隆差异表达基因的技术。一般是将一种细胞的互补DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)与第二种细胞cDNA或mRNA相互杂交,其不被杂交的部分就代表了两种细胞基因表达的差异,可用于差异...
抑制消减杂交反应 将抗病和感病样本的双链 cDNA 分别作为 tester 和 driver。首先，对 tester cDNA 进行酶切处理，产生粘性末端。然后，将 tester 和 driver cDNA 进行两轮杂交。在杂交过程中，利用抑制消减杂交技术的原理，使差异表达基因在杂交过程中得到富集。具体而言，通过设计特定的引物和接头，使得只有在 tester...