抑制性消减杂交技术是一种以抑制性PCR 反应为基础，将标准化测试cDNA 单链步骤和消减杂交步骤合为一体的技术。通过合成两个不同的接头，接于经限制性内切酶消化后的测试cDNA 片段的5’末端，将测试和驱动进行两轮杂交。所谓抑制性PCR 是利用链内退火优于链间退火，使非目的序列片段两端的长反向重复序列在退火时产生...
目前已经有很多分子生物学技术可用于研究基因表达差异,其中Diatchenko L等1996年建立的抑制性消减杂交法( Suppression Subtractive hybridization, SSH)以其假阳性率低、灵敏度高、低背景、重复性强和检测范围广等优点迅速得到广泛应用,已成功用于不同细胞株、不同器官组织、个体不同发育阶段以及机体在外界因子作用下差异...
抑制性消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization, SSH)技术是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的一项重要实验手段,如:正常和突变个体,正常与疾病个体,正常和高温个体,等等,这为从基因转录组水平研究胁迫及疾病差异表达基因提供重要思路。 目前该技术主要采用PCR-Select™ cDNA Subtraction方法,而这一方法主要...
以干旱胁迫下的黄檗幼苗cDNA为tester,正常生长的黄檗幼苗cDNA为driver,利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH)构建了干旱胁迫下黄檗幼苗的消减文库并对其进行了EST序列分析。从消减文库中随机挑取20个阳性克隆,提取质粒进行酶切和PCR鉴定,显示文库克隆的重组率大于95%,插入片段大小大部分集中在30...
基于抑制性消减杂交(SSH)的方法构建cDNA文库是近年来发展起来的进行功能基因组学研究,寻找差异基因的一种非常有效的方法,该技术克服了消减杂交技术无法克隆低丰度表达基因的缺陷,并且降低了假阳性率,相对于其它差异显示技术具有很大的优越性。 操作程序 1.由您提供相关背景材料以供参考。 2.签订技术服务合同,商定...
抑制消减杂交技术,抑制消减杂交技术,该方法运用了杂交二级动力学原理,即高丰度的单链DNA在退火时产生同源杂交的速度快于丰度低的单链DNA,从而使原来在丰度上有差别的单链DNA相对含量达到基本一致。而抑制PCR则利用链内退火优于链间退火的特点,使非目的序列片段两端反向
抑制性消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)是利用PCR 反应链内退火优先于链间退火的特点和分子杂交二级动力学原理,经过体系不断优化建立起来的快捷、有效地差异基因筛选方法,具有低丰度mRNA 富集效率高、假阳性低、灵敏度高、重复性好等特点。现已广泛应用于动植物发育和分化、疾病易感性差异、抗药性差异...
福建医科大学博士学位论文1.应用抑制性消减杂交技术(SSH)筛选、分离、克隆急性白血病复发相关基因;2.聚合酶链转化-阻断PCR消减法:一种新的筛选差异表达基因方法的建立和验证姓名:***请学位级别:博士专业:内科学(血液病学)指导教师:**达200903011.应用抑制性消减杂交技术(SSH)筛选、分离、克隆急性白血病复发相关基因...
规范用词消减杂交 英文翻译subtracting hybridization 名词定义利用不同组织、细胞或不同状态下组织、细胞基因表达的差异性,并结合核酸杂交建立的克隆差异表达基因的技术。一般是将一种细胞的互补DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)与第二种细胞cDNA或mRNA相互杂交,其不被杂交的部分就代表了两种细胞基因表达的差异,可用于差异...