1985年,Xu-Dong Zhu等报道了源自酿酒酵母的FLP重组酶,它是由423个氨基酸组成的单体蛋白,可以特异性识别FRT(Flp recognition target)位点。而FRT与loxP位点非常相似,同样由两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔序列构成,间隔序列决定了FRT的方向。在重组方式上,Flp-FRT系统与Cre-loxP系统类似。2. Dre-Rox...
LoxP元件也有一些突变体,间隔区和回文序列都可以进行突变,突变后的序列依然能被Cre重组酶识别和重组,但是突变的LoxP序列必须和同样突变的LoxP序列匹配介导基因重组,而不能和未突变的LoxP序列匹配,这样将不同的LoxP序列组合用于控制多个基因(DIO/DO系统中的Lox2272位点),在同一Cre重组酶的作用下,可以实现多序列...
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。物质简介 Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白,分子量约38kDa。它可以识别催化两个LoxP位点之间发生同源重组,...
在数十种活性增强的 Bxb1 变体中,在人类细胞中,一种进化的变体 evoBxb1 与重组酶附着位点整合,其基因组整合效率平均提高了 2.7 倍。然后,该团队结合进化突变筛选出了活性更高的变体 eeBxb1,其在小鼠和人类细胞中可平均整合 30% 的基因有效载荷,比原始技术 PASSIGE 的载货量多了 4 倍,比另一种定点...
2024年6月,一项研究揭示了RNA指导的重组酶的新特性,这些酶可以通过一种称为“桥RNA”(bRNA)的特殊工具,在基因组的指定位置精确地插入或删除DNA序列。bRNA像是这些重组酶的GPS导航系统,指引它们到达特定的“目的地”。想象一下,这些重组酶就像是一群受过专业培训的修理工,而bRNA则是他们的图纸和指南,确保...
Cre重组酶的C-末端结构域包含催化活性位点,能够催化DNA分子中特定位点之间的重组。而且与限制酶相似,能识别特异的DNA序列,即loxP位点,使loxP位点间的基因序列被删除或重组。LoxP序列 locus of X (cross)-over in P1),是位于P1噬菌体中长度为34bp的一段序列,由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列...
Cre/loxP重组酶系统,指的是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心,在新型基因打靶中获得广泛应用,是由Sternberg和Hamilton提出。重组酶与序列 Cre重组酶:于1981年从P1噬菌体中发现,属于λ Int酶超基因家族。Cre重组酶基因编码区序列全长1029bp(EMBL数据库登录号X03453),编码由 343...
重组酶聚合酶扩增技术通过模拟DNA体内扩增,在等温条件下产生目的片段。该技术主要依赖重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶。重组酶能够不通过加热就解开双链DNA。重组酶聚合酶扩增反应开始时,重组酶在ATP的参与下结合引物,形成核酸蛋白复合体,这些复合体能够扫描与引物序列互补的目标双链DNA。接着,核酸蛋白复合体...
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP识别一个34bp序列,其两端是两个13bp的反向重复序列,中间是起定向作用的8bp间隔区。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向而不同,两个含单loxP位点的DNA...