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然后通过离心收获细胞并重悬于适当的电转缓冲液中。还制备DNA或其他感兴趣的分子。这可能涉及分离和纯化DNA或制备所需分子的溶液。 2.电转细胞: 细胞-DNA混合物被转移到电转杯中,该电转杯是专为电转而设计的专用腔室。将电转杯放置在称为电转仪的电转装置中。通过激活电转装置将电脉冲施加到细胞上。 3. ...
二 电转仪器设置(GenePulser Xcell,BIO-RAD) 1, 打开侧壁的电源开关,显示出Homo页面如下图,通过绿色的上下左右键选择“Pre-set protocols”,点击中间的蓝色“ENTER”键 2,Pre-set 界面上出现了程序预设的针对不同哺乳动物细胞系的电转条件,我们同样操作,选择293细胞,点击中间的蓝色“ENTER”键 ...
外源物质递送:可使用Lonza 4D-NucleofectorTM技术对外泌体施加电脉冲,从而使外源物质(例如核酸、蛋白质、药物、小分子等)进入外泌体中。这些进行过修饰的外泌体可以研究功能分子对受体细胞的影响,例如基因表达、信号转导途径或疾病进展,也可以用于靶向药物递送、基因治疗、免疫治疗或再生医学。
1.收获目的细胞:按照转染需要的细胞量进行计数,如20 µl电转体系可转1x104-1x106个细胞,100 µl电转体系可转1x105-1x107个细胞; 2.混匀:低速离心,尽量吸去细胞上清,用电转Buffer重悬细胞,加入转染杯,加入准备好的质粒DNA,轻轻混匀,避免产生气泡; ...
首先,细胞的生理状态是影响细胞电转效率的重要因素。选择生长活跃、状态健康、无污染、低代次的细胞可...
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前言:上周我们介绍了电池技术,其中锂电池是目前应用比较广泛的一种电储能技术,但在储能密度和储能时间上来看仍具有一定的劣势,相较于此,电转气技术(简称P2G或PtG)在这两方面有着绝对的优势。这种通过将电力转化为气体燃料的技术,利用了电解水的化学过程产生了氢气,氢气可以直接使用或者通过其他步骤再转化为合成气体(...