1、感受态细胞的概念 感受态,是指宿主细胞最容易接受外源基因并实现将其转化的一种生理状态,它是由受体菌的遗传性状所决定的,同时也受菌龄以及外界环境因子的影响, 比如 Ca2+就可以大大促进转化的作用。细胞的感受态一般出现在对数生长期,新鲜幼嫩的细胞是制备感受态细胞和进行成功转化的关键。 2、感受态细胞制备的原理...
1ng的cccDNA即可使50μl的感受态细胞达到饱和。一般情况下,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%。 (3).试剂的质量:所用的试剂,如CaCl2等均需是最高纯度的(GR.或AR.),并用超纯水配制,最好分装保存于干燥的冷暗处。 (4).防止杂菌和杂DNA的污染:整个操作过程均应在无菌条件下进行,所用器皿,如离心管, ...
1) 取100μL冰上融化的感受态细胞,加入目的DNA(质粒或连接产物),轻轻混匀,冰上静置5min; 2) 42℃水浴热激45s,迅速放回冰上静置2min(该过程注意不要晃动离心管,以免降低转化效率); 3) 向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基(2×YT或LB),混匀后根据实验需求吸取不同体积的感受态细胞加到含有相应抗生...
一、感受态细胞的概念 常态的细胞不能摄入外部溶液中的DNA,所以要转化质粒DNA进入大肠杆菌必须首先制备感受态的大肠杆菌细胞。 所谓的感受态细胞,即指受体(或者宿主)最易接受外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态。通俗的讲,就是受体细胞经过一些特殊方法(如:CaCl2,RuC...
感受态的分类根据不同实验目的,感受态细胞来源有原核受体细胞(大肠杆菌G-、乳酸菌G+、枯草杆菌G+等)和真核受体细胞(酵母菌、动植物、昆虫等)。大肠杆菌作为构建普通质粒、病毒载体和各种文库以及异源蛋白表达的重要工具,其相应的感受态在分子克隆实验与蛋白表达实验中是极其重要的。不同感受态的区别是什么呢?目前...
作为新手的我们,要想制备一款敏感却不脆弱的感受态,得先了解。 感受态细胞是什么? 理化方法诱导细胞,使其处于容易吸收外源DNA的生理状态,这种细胞即为感受态细胞。 感受态细胞制备的常用方法 目前制备感受态细胞常用的方法有RbCl (KCl)法、CaCl2法、电击感受态法等。其中,RbCl (KCl)法制备的感受态细胞转化效率较高,但...
感受态名词解释 感受态名词是指一种表达情感的词汇,它可以表达一个人的情绪、态度、思想和感受。它们可以帮助人们更好地表达自己的情感,并且可以更有效地传达情感。 感受态名词可以帮助人们更好地表达自己的情感,比如“悲伤”、“激动”、“恐惧”、“愤怒”、“害怕”、“担心”、“满足”、“欢乐”等等。这些词汇...
百度试题 结果1 题目名词术语解释感受态(competence): 相关知识点: 试题来源: 解析 感受态(competence):细菌吸收外源 DNA时的生理状态。
答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 细胞处于能够吸收DNA的状态称感受态作用就是此时容易接受外来DNA比如要将重组质粒导入大肠杆菌的时候,可以用氯化钠处理大肠杆菌,使大肠杆菌处于感受态,就容易转导成功了 解析看不懂?免费查看同类题视频解析查看解答 相似问题 感受态因子在细菌转化中的作用? 什么是超级感受态?超级...