湿转与半干转(转膜方式)【WB实验外包】 1。湿转,顾名思义,就是由滤纸,膜,胶组成的三明治泡在转膜液中完成的转膜液通常的配方为:Tris 3.0 g,Glycine 14.4 g,甲醇:200 ml,加去离子水至1000 ml 2.半干转,…
1 X转膜液(现配现用):Tris base3.03gGlyc ine14.42g甲醇150ml加水定容至1000ml6. 10 X TBSTris base 12.1gNaCl40g加水,用浓盐酸调整PH至7.6后定容至500ml7. TBST1 X TBS/ 吐温=1000/18. 封闭液:脱脂奶粉2gTBST40ml配己胶:先配分离胶,再配积层胶。一般两者同时配制,只是最后分离胶先加 TEME混合后立即...
TBST配方 电泳时间 转膜三明治的制作 蛋白免疫印迹(Western Blotting)是将电泳分离后的蛋白质从凝胶转移到NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定蛋白的一种蛋白质检测技术。 电泳液配方 Glycine 18.80 g Tris 3.02 g SDS 1g 双蒸水 定容至1 L,提前1天配制,4℃保存转膜...
WB试剂配方 10×转膜缓冲液(Tris-base19.3g ;Glycine 90g加去离子水至1L)1×转膜缓冲液(10×转膜缓冲液:甲醇:去离子水=1:2:7) 5×电泳液 Tris-base 15.15g Glycine 94g SDS 5g(SDS可水浴溶解) 加去离子水至1L 用前去离子水稀释成1×电泳液 1×Tris盐酸缓冲液(TBS)(pH8.0) 10mM Tris-base 1.21g ...
根据转膜方式不同,转膜缓冲液配方也有一定变化,以下是两种常用转膜缓冲液配方:1.湿转缓冲液2.半干转缓冲液3.转膜完成之后,我们即可进行封闭和抗体孵育过程,这个过程中用量比较大的试剂是1X TBST洗涤液,其配方如下:转膜结束后,即可进行显色操作。目前一般采用增强化学发光(ECL)...
1X转膜缓冲液 (采用) 甘氨酸(MW75.07) 2.9 g Tris(MW121.14) 5.8 g SDS 0.37g 浓盐酸 1.8 ml 蒸馏水至 800ml 加甲醇200ml定容至1000ml 10XTBS缓冲液 Tris(MW121.14) 24.2g NaCl 80.0g KCl 2g 蒸馏水至 1000ml (浓HCl调pH至7.6),混匀室温保存。
wb洗膜配置1X转膜缓冲液采用甘氨酸2.9g、Tris 5.8g、SDS 0.37g、浓盐酸1.8 ml 、蒸馏水至800ml、加甲醇200ml定容至1000ml。10X 转膜缓冲液的配置是甘氨酸151.1g、Tris 30.3g、蒸馏水至1000ml溶解后室温保存，用时稀释10倍，并加入甲醇至20%。通常取80ml母液，加560ml蒸馏水，最后加160ml甲醇...
1。湿转,顾名思义,就是由滤纸,膜,胶组成的三明治泡在转膜液中完成的转膜液通常的配方为:Tris3.0g,Glycine14.4g,甲醇:200ml,加去离子水至1000ml 2.半干转,三明治在转膜过程中并没有浸没在转膜液中,但在转膜之前用相应的电转液浸泡滤纸,膜,胶一定时间。
WB试剂配方10×转膜缓冲液(Tris-base19.3g;Glycine 90g加去离子水至1L) 1×转膜缓冲液(10×转膜缓冲液:甲醇:去离子水=1:2:7) 5×电泳液 Tris-base 15.15g Glycine 94g SDS 5g(SDS可水浴溶解) 加去离子水至1L 用前去离子水稀释成1×电泳液 1×Tris盐酸缓冲液(TBS)(pH8.0) 10mM Tris-base 1.21g ...