答:①引物应用核酸序列保守区内设计并具有特异性②产物不能形成二级结构 ③引物长度一般在15——30碱基之间 ④J+C含量在40%-60%之间 ⑤碱基要随机分布 ⑥引物自身不能有连续四个碱基的互补 ⑦引物之间不能有连续四个碱基的互补 ⑧引物5‘端可以修饰 ⑨引物3‘端不可修饰 ⑩引物3’端要避开密码子的第三位反...
PCR过程中引物设计的基本原则有哪些?(参考答案)(1)引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于 Taq DNA聚合酶进行反应。(2)G+C含量:应在40%-60%之间。(3)碱基分布的随机性:应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3′端出现超过3个的连...
7. 引物间互补性:引物之间不应有多于4个连续碱基的互补,以免形成引物二聚体。 8. 引物5'端修饰:可以在引物的5'端加入酶切位点序列或其他功能性基团,但不会影响扩增特异性。 9. 引物3'端:3'端不能进行任何修饰,因为PCR延伸反应是从3'端开始的。同时,3'端应避免终止于密码子的第3位,以防止简并性...
PCR引物设计的原则主要有哪些?相关知识点: 试题来源: 解析 (1)引物长度:10～30Nt; (2)碱基分布:A、T、G、C随机分布; (3)G+C含量:40%～60%Tm=4(G+C)+2(A+T); (4)引物之间:避免3′端互补; (5)引物自身:不应形成二级结构; (6)引物3′末端碱基:最好选T、C、G,不选A; (7)引物5′末端...
PCR引物设计原则是确保PCR反应能够有效、特异性地扩增目标DNA序列的关键。以下是PCR引物设计的主要原则: 1. 引物长度:引物长度通常为18-30nt,20nt左右最为常用。上下游引物的长度应基本相等,最多相差不超过3bp。引物过短可能导致非特异扩增,而较长的引物虽然特异性好,但易形成二级结构。 2. 引物GC含量:GC含量应...
一、选择适当的引物长度引物长度是pcr引物设计的基本参数之一,一般而言,较短的引物长度可以减少引物间的非特异性结合,从而提高特异性。然而,引物长度也不能过短,否则可能会导致引物自身出现错配的情况。通常,引物长度在15-30碱基之间较为适宜。二、合理配置碱基组成引物中的碱基组成对其特异性有着重要影响。在引物设计...
⑸引物自身不能有连续4个碱基互补; ⑹引物之间不能有连续4个碱基的互补; ⑺引物端可以修饰; ⑻引物不可修饰; ⑼引物端要避开密码子的第三位。 答案解析 略 真诚赞赏,手留余香 小额打赏 169人已赞赏相似试题 (简答题) 简述PCR的原理和引物设计原则。 答案解析 (简答题) 简述PCR引物设计的基本原则及其注意...
1 )引物长度 15-30bp 20 左右为宜 长 / 短 2 )产物长度(跨度) 200-500bp 3 )引物的碱基 随机分布 GC 45-55% 4 )避免引物间互补 5 )避免引物自身互补 6 ) 3’ 端的碱基 2-8 个碱基应严格和模板配对 7 ) 5’ 端可以加入适当的修饰 如 RE 位点等人工接头 8 )特异性特别是 3’端 9 )引物...
pcr引物设计的基本原则有哪些 PCR引物设计的11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相 下列关于real-time PCR引物设计的原则中,不正确的是 ( 难度:1... A qpcr引物设计研究,病毒包装,质粒构建 吉满生物专注于环状RNA相关产品研发和服务.qpcr引物设计研究,病毒包装,质粒...