原则:首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构,再次引物不能再模板的非等位点引发DNA聚合反应(即错配)。 注意要点: 1、引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适合于TaqDNA聚合酶进行反应。 2、引物序列在模板...
在引物的5`端连接一对限制酶的识别序列,这样便于目的基因连接到载体上。 引 物设计要点(5) 退火温度高,扩增特异性强;退火温度低,扩增效率高。 原因是:如果引物碱基数较少,可以适当提高退火温度,这样可以使PCR的特异性增加;如果碱基数较多,那么可以适当减低退火温度,使...
尤其是要避免引物3’端形成发夹结构,否则将严重影响DNA聚合酶的延伸。 引物3’端: 引物的延伸从3’端开始,因此3’端的几个碱基与模板DNA均需严格配对,不能进行任何修饰,否则不能进行有效的延伸,甚至导致PCR扩增完全失败。考虑到密码子的简并性,引物3’端最后一个碱基最好不与密码子第三个碱基配对。 引物5’端...
引物设计应注意如下要点: 1. 引物最好在模板 cDNA 的保守区内设计。 DNA 序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在 NCBI 上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。 2. 引物长度...
PCR 引物设计原则的 5 个要点 PCR 引物是人工合成的两段寡核苷酸。一个与感兴趣区域一端的一条 DNA 模板链互补, 另—个与感兴趣区域另一端的另一条 DNA 模板链互补。 PCR 产物的特异性取决于引物与模板 DNA 互补的程度。引物是 PCR 特异性反应的关键。 引物设计要点(3) 碱基要随机分布,且引物自身和...
简述PCR引物设计的基本原则及其注意要点查看答案更多“简述PCR引物设计的基本原则及其注意要点”相关的问题 第1题 简述DNA计算实现方式中,表面方式与试管方式相比具有哪些优点? 点击查看答案 第2题 简述DNA计算机的基本原理 点击查看答案 第3题 先导化合物的来源有四种来源 点击查看答案 第4题 分子途径和网络的特...
题目题型:选答,填空 难度:★★★5.3万热度 简述PCR引物设计的基本原则及其注意要点 正确答案 点击免费查看答案 试题上传试题纠错 TAGS 简述PCR引物设计基本原则及其注意要点关键词试题汇总大全 本题目来自[12题库]本页地址:https://www.12tiku.com/newtiku/9999/25860209.html...
百度试题 题目简述PCR引物设计的基本原则及其注意要点 相关知识点: 试题来源: 解析 原则:首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构,再次引物不能再模板的非等位点引发DNA聚合反应(即错配)。 注意要点:\n反馈 收藏 ...
原则:首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构,再次引物不能再模板的非等位点引发DNA聚合反应(即错配)。 注意要点: 1、引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适合于TaqDNA聚合酶进行反应。 2、引物序列在模板...