荧光素酶基因报告是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光，是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。荧光素酶基因报告是一种很有效的检测报告手段然后可以通过...
常见的荧光素酶报告基因包括荧光素酶(也称为火萤酶)和绿色荧光蛋白(GFP)等。 荧光素酶报告基因的应用非常广泛,可以用于研究基因表达和调控、蛋白质定位和运动、细胞增殖和分化等方面。通过将荧光素酶报告基因与特定的调控元件(如启动子、转录因子结合位点等)连接,研究人员可以利用荧光素酶活性来监测基因的表达水平和...
1. 在萤光素酶存在的条件下,萤光素+ATP生成萤光素化腺苷酸+ ADP。 2. 将萤光素化腺苷酸+氧气转化为氧化萤光素+AMP以及光。 萤火虫荧光素酶一般是作为主报告基因,将目的基因构建在该载体上,从而反应目的序列的作用结果,因此根据我们的实验目的,可以针对此质粒进行改造,载体的工作原理如下图所示: 海肾荧光素酶催...
荧光素酶是一种产生生物发光的酶,其反应需要荧光素底物和三种辅因子(氧、镁离子和ATP)的参与。在荧光素底物的作用下,荧光素酶催化氧化反应,产生生物发光。这种发光反应是高度特异和高效的,因此被广泛应用于生物学研究中。 荧光素酶报告基因的应用 荧光素酶报告基因被广泛应用于基因表达、蛋白质相互作用、信号通路等...
荧光素酶报告基因在基因表达研究中起到了关键作用。它的工作原理是将荧光素酶基因与目标基因连接起来,使得荧光素酶能够转录和翻译荧光素底物。当目标基因表达时,荧光素酶会发出可见光信号,从而指示目标基因的表达水平。 2. 2.1 荧光素酶报告基因的基本原理是将荧光素酶基因与目标基因连接起来,形成一个融合蛋白。当目...
将目的基因转录调控原件构建到萤火虫荧光素酶报告基因质粒上,与海肾荧光素酶内参基因质粒共转染细胞,裂解细胞后分别加入荧光素酶底物,会发出生物荧光,从而被荧光测定仪读取。计算萤火虫荧光素酶/海肾荧光素酶的相对比值,可以判断对目的基因转录调控原件的影响。
萤火虫荧光素酶报告基因 •荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，•萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化荧光素（luciferin）[lu:'sɪfərɪn]氧化成氧化荧光素（oxyluciferin）[ɒksɪlu:'sɪfərɪn]。在荧光素（...
荧光素酶报告基因技术简介 荧光素酶报告基因技术是一种灵敏、高效的基因表达检测方法。该技术利用荧光素酶与特定底物反应产生生物发光的原理，通过检测发光强度来反映目的基因的 表达水平。荧光素酶报告基因系统包括荧光素酶基因、启动子、目的基因和 荧光素酶底物等组成部分。实验目的和意义 验证目的基因在特定细胞或组织...
1. 验证miRNA同靶基因的互作mRNA靶向互作。 2. 启动子/增强子结构分析。 3. 验证特定转录因子同其调控序列的作用。 4. 验证信号通路活化。 案例展示 技术简介 荧光素酶(Luciferase)报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测荧光素酶活性的一种报告系统。该系统中,荧光素酶催化其底物荧光素氧化,并将该反应的...