依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)是在PCR基础上发展起来的一种新技术,是由1对带有T7启动子序列的引物引导的连续、等温、基于酶反应的核酸扩增技术,反应在41℃进行,可以在2小时左右将模板RNA扩增约109倍,比常规PCR法高1000倍,不需特殊的仪器。 该技术一出现就被用于疾病的快速诊断和病人血清中HIV-1的定量检测。尽管...
例如 Shirato K 等人建立的呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV) 64 RT-LAMP 检测方法中,分别利用限制性内切酶 NlaIII和 XbaI对 A 亚型扩增产物和 B 亚型 扩增产物进行酶切,37°C作用 1h 后电泳检测,特异性扩增产物会由原先的瀑布状梯形条带 变为清晰可数的几条电泳条带(图 6.15)。电泳检测的缺点...
数字PCR(DigitalPCR, dPCR, Dig-PCR)通过终点检测计算目标序列的拷贝数,无需采用内参和标准曲线即可进行精确的绝对定量检测。 数字PCR采用终点检测,不依赖于Ct值(循环阈值),所以数字PCR反应受扩增效率的影响降低,对PCR反应抑制物的耐受能力提高,具有很高的准确度...
目前PCR技术虽然是最受欢迎的扩增技术,被广泛应用于各个领域,但与PCR相比,等温扩增技术具有特异性强、敏感性高、简单便捷和成本低等优点,因此等温扩增技术越来越受到科研工作者的青睐。 自1990年代初以来,已开发出数十种采用各种扩增机制的等温核酸扩增技术,其中环...
在对DNA样本进行测序之前,通常需要对其进行扩增。PCR是最为常用且广为人知的扩增方法,但还有另一种选择,那就是等温扩增(isothermal amplification)。温度是否变化,是等温扩增和PCR扩增之间的主要区别。 在PCR中,热循环仪反复改变反应温度,影响各种试剂的作用;相比之下,等温扩增方法则在单一温度下扩增DNA,它采用链置换DN...
还在死磕PCR 适合多种检测手段 全程恒定温度 设备要求低 RCA 聚合酶扩增 聚合酶扩增 环介导 依赖核酸 交叉引物扩增 LAMP NASBA SPIA HAD CPA 重组酶 RSA RPA LAMP应用最为广泛 序列的护塔 广泛应用于各种病原体的研究 病原菌 寄生虫 基于该技术 全式金推出2款Bst DNA聚合酶 扩增灵敏性高 (c.ei)nR 特异性...
01 等温扩增技术及主要厂家 等温扩增技术(Isothermal AmplificationTechnology)是在恒定温度条件下的核酸体外扩增技术,相比于PCR,不需要升降温控制,具有反应时间短、扩增效率高等优势。 常见的等温扩增技术有环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification...
AMPLON使用一种新型聚合物材料,具有独特的多臂聚乙二醇(PEG)-DNA引物,可在等温条件下进行高效的DNA扩增。数据显示,AMPLON具有高灵敏度,可检测低至100拷贝/mL的靶标浓度,与使用灵敏引物的实时定量PCR相比,AMPLON能够可靠地鉴定血浆样本中的HIV-1 RNA,一致性达到95%。AMPLON能够在30分钟内实现高度特异性和灵敏的靶标...
等温扩增PCR的原理是通过利用DNA聚合酶酶切酶活性和DNA双链结构的特性,实现DNA片段的扩增。在等温条件下,通过一系列的循环反应,DNA片段的数量可以指数级增加。 等温扩增PCR的步骤包括:将DNA模板加入反应液中。然后,通过加入适当的引物和DNA聚合酶,引物可以与目标DNA片段的两端结合,并通过DNA聚合酶的酶切作用,将DNA片...
等温荧光扩增仪是一款等温扩增技术与荧光信号检测技术相结合的等温荧光PCR仪。可实现扩增过程的实时监测,具有控温精度高、灵敏度高、重复性好等优点。仪器内置人性化操作系统,同时采用先进的数学模型进行数据处理和图形绘制,可自动判读结果。设备可广泛用于临床疾病的诊断、流行性细菌/病毒的定性/定量检测、动物胚胎性别鉴定...