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1、引物应⽤核酸系列保守区设计并具有特异性。最好位于编码区5\'端的300-400bp区域内，可以⽤DNAMAN，Alignment软件看看结果。2、不能形成2级结构。3、引物长度⼀般在17-25bp之间，上下游引物不能相差太⼤。4、G+C含量在40-60%之间，45-55%最佳。5、碱基要随机分布，尽量均匀。6、引物⾃⾝不能有...
1. 选择需要设计引物的基因——例如EPO 2. 进入NCBI美国国立生物技术信息中心网站National Center for Biotechnology Information 选择基因搜索条目,输入需要查找的基因,然后点击search搜索。 3.每个基因具体有多种物种的——例如EPO有(human)、(house mouse)、 (Norway rat)等等。选择其中需要的点击进入。
"How To Create Real-Time PCR Primers Using Primer-BLAST" from YouTube, 视频播放量 2746、弹幕量 0、点赞数 86、投硬币枚数 12、收藏人数 258、转发人数 18, 视频作者 无非一梦, 作者简介 下辈子不学医.,相关视频:PCR Primer Design【PCR引物设计】,设计PCR引物(How
1) 引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 2) 引物长度一般在15-30碱基之间。 3) 引物GC含量在40%-60%之间,Tm值最好接近72℃。 4) 引物3′端要避开密码子的第3位。 5) 引物3′端不能选择A,最好选择T。 6) 碱基要随机分布。 7) 引物自身及引物之间不应存在互补序列。
具体步骤主要分为三步,分别是碱基序列的获取、转换以及引物的设计。以染色体坐标为chr1:100,021,994-100,023,255的eccDNA为例,进行碱基序列的获取及引物设计。 一、获取碱基序列 1、打开UCSC genome browser 网站,点开Genomes栏,选择测序参考的基因组,如hg19。
《引物设计教程》ppt课件 •引物设计概述•引物设计的步骤•引物设计的优化策略•引物设计的实际应用•引物设计常见问题与解决方案 目录 01 引物设计概述 引物的定义与作用 引物定义 引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与目的基因一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与目的基因另一端的另一条DNA模板...
Exon junction设计:尽量在外显子接合处设计引物,以限制基因组DNA的扩增。 特异性验证:使用BLAST检索确认引物的特异性。 三、NCBI查找目标基因 打开NCBI网页:访问NCBI网站。 搜索目标基因:在搜索栏里输入基因名称和物种,选择“Gene”数据库,点击搜索。 确认基因信息:检查搜索结果中的基因名称和物种信息,确认目标基因。