①在实验前三天腹腔注射1mL的3%巯基乙酸盐肉汤,可获得更多数量的巨噬细胞。 ②将眼科剪、眼科镊等金属器械高压灭菌,离心管辐照消毒,小鼠禁食8h,实验前将超净工作台紫外线消毒30min。 2、细胞提取 ①脱颈处死小鼠,将全鼠浸入70%酒精中3~5秒后,仰卧于不锈钢方盘上。 ...
6、含10ng/ml M-CSF的DMEM完全培养基重悬,铺板。 7、培养3天换液,继续孵育3-4天成熟
原代骨髓来源的巨噬细胞BMDM提取与诱导 小鼠骨髓来源的巨噬细胞(Bone marrow-derived macrophages, BMDM)。它最大的优点在于它是原代细胞,其性状和功能更贴近与小鼠机体本身的巨噬细胞,被广大研究人员充分肯定并接受。其次每次试验先用现提,避免了实验室祖传细胞株培养变异的情况,试验结果稳定可靠。实验所需的动物...
目前已自主开发了大量标准商品化的原代细胞,包括多物种、多组织来源的原代干细胞(如间充质干细胞、神经干细胞、胚胎干细胞)和原代体细胞(如成纤维细胞、神经元、星形胶质细胞、巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞等),细胞在提取后会经过流式、免疫荧光或功能验证等鉴定,具有代次低、形态优、质量高等优点。此外,我们为...
在提取小鼠原代巨噬细胞的过程中,需要遵循一定的步骤和注意事项,以确保细胞的完整性和活性。 材料准备: 1.小鼠整体麻醉; 2.培养皿、培养瓶等细胞培养用具; 3.胰酶、EDTA等细胞消化试剂; 4.抗生素、血清等细胞培养基添加剂; 5.记号笔、显微镜等工具。 提取步骤: 1.小鼠整体麻醉后,打开胸腔,暴露出肺组织,剪取...
摘要 本发明提供一种生物工程技术领域的鲤鱼原代巨噬细胞的提取和鉴定方法,即,选鲤鱼进行解剖,无菌取头肾并剪碎,经细胞筛过滤得细胞悬液,后经离心洗涤,加入细胞培养液得到新的细胞悬液;用血小球计数板进行计数,再以最适培养条件铺板法培养增殖,最后对得到的原代巨噬细胞多种方法镜检鉴定。本发明直接无菌取鲤鱼头肾...
1.一种鲤鱼原代巨噬细胞的提取和鉴定方法,其特征在于包括以下步骤: a. 细胞的提取:选择规格均匀、体格健壮的平均体重 400-600g 的红鲤鱼预养 2 周;首先按组成为 100 ml HBSS,1 ml 1%双抗储液,100 μl 10U/ml Heparin(肝素 钠)储液配制 Hank’s 平衡盐工作液;还有培养基液,铺板法中所用对鲤鱼巨噬...
小鼠原代腹腔巨噬细胞提取方法(超详细) 实验前准备: 超净工作台、水平式低速离心机、10ml离心管、2.5mL注射器、细胞吸管、3%肉汤淀粉溶液、无菌眼科剪、无菌眼科镊、75%酒精溶液、无菌PBS溶液、DMEM细胞培养基、胎牛血清、细胞计数版、倒置显微镜等。 实验操作步骤 (1)我们对健康雄性C57BL/6小鼠腹腔注射3%肉汤淀粉...
方法:在同一实验条件下,采用肺泡灌洗液提取、脾脏提取及外周血提取3种不同的原代细胞培养方法培养大鼠巨噬细胞。结果与结论:①肺泡灌洗液提取、脾脏提取及外周血提取法各组巨噬细胞培养提取细胞个数平均值分别为(1.14±0.14)×106个、(9.29±0.19)×106个及(3.17±0.13)×106个,3组间比较差异有显著性...
方法:在同一实验条件下,采用肺泡灌洗液提取、脾脏提取及外周血提取3种不同的原代细胞培养方法培养大鼠巨噬细胞。结果与结论:(1)肺泡灌洗液提取、脾脏提取及外周血提取法各组巨噬细胞培养提取细胞个数平均值分别为(1.14±0.14)×10^6个、(9.29±0.19)×10^6个及(3.17±0.13)×10^6个,3组间比较差异有显著性...