所谓亲和萃取或亲和分配(affinity partitioning),即把一种亲和配基(Ligand)与一种成相聚合物PEG或Dx以共价相结合,这种配基与欲提取的蛋白质有很强的亲和力。这样不但使体系具有双水相处理量大的特点,而且具有亲和层析专一性高的优点相关知识点: 试题来源:
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3.以提取玉米中的黄曲霉毒素为例,其提取方法包括如下步骤:称取粉碎的样品于离心管中,加入甲醇-水(7:3)进行提取,经过涡旋混匀、均质、离心、过滤后,得到样品粗提液;将免疫亲和柱与上样管组合后,放置在操作架上,移入滤液,然后分别经过淋洗液以及洗脱液的处理后,得到纯化后的黄曲霉毒素。 4.由于免疫亲和柱的...
将纯化抗原或粗制抗原(如是单价特异性则对抗原要求不高)交联Sepharose4B制成亲和层析柱,将抗血清过柱后洗去未结合的杂蛋白,再用硫氰酸钾洗脱,流出的是纯的特异性IgG抗体。因硫氰酸钾对抗体有破坏作用,应及时透析除去。纯化的IgG因含量低,失去保护作用,应及时应用或冻干保存,亦可20℃保存,但皆不理想;加入三乙醇胺...
亲和层析捕获法是基于多孔材料与磷酯酰丝氨酸(PS)的可逆集合洗脱原理,采用与外泌体高亲和力的大孔径材料对外泌体进行纯化的方法。 样品在结合缓冲液的作用下,外泌体特异性的吸附在多孔材料表面,而其他的非磷脂蛋白质等杂质不被吸附,从而在清洗的过程中,去除掉蛋白等杂质,经过洗脱后,最终获得纯化的外泌体溶液。
3、黄曲霉毒素免疫亲和柱的净化步骤: 1)回温解冻:提前半个小时将黄曲霉毒素免疫亲和柱从冰箱拿出常温解冻; 2)上样:准确移取20mL提取好的样品溶液注入免疫亲和柱,使溶液以1滴/S的速度通过免疫亲和柱,直至2mL-3mL空气通过柱体,弃去流出液; 3)淋洗:用20mL水淋洗免疫亲和柱,流速为1滴/s--2滴/s,淋洗两...
外泌体提取(亲和层析)原理: 大体积样本外泌体提取试剂盒 亲和层析捕获法是基于多孔材料与PS的可逆结合洗脱,上海乐赛生物采用与外泌体高亲和力的大孔径材料的纯化方式。样品在结合缓冲液(EV-SB)的作用下外泌体特异的吸附在多孔材料的表面,而其他非磷脂蛋白质等杂质则不被吸附而去除。吸附了外泌体的多孔材料经洗液...
摘要 本申请涉及一种免疫亲和操作仪及样品提取方法。一种免疫亲和操作仪,包括壳体、样品旋转装置、脱盖装置、淋洗装置、洗脱装置及收集旋转装置;所述样品旋转装置包括用于放置免疫亲和柱的样品盘以及驱动样品盘水平转动的第一驱动机构;所述脱盖装置用于脱除免疫亲和柱的盖堵;所述淋洗装置用于对免疫亲和柱内的样品进行...
亲和层析法提取谷胱甘肽转硫酶实验中,缓冲液buffer A中的DTT的作用是A.金属离子螯合剂,抑制金属蛋白酶活性B.竞争洗脱GSTC.还原剂,防止巯基的氧化,保护酶活性