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摘要 本发明公开了一种家蚕中部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其构建方法和应用。获得丝胶蛋白1基因启动子、18srRNA基因启动子、His6序列、DDDDK、丝素轻链蛋白信号肽、丝素轻链基因3’末端序列、家蚕肌动蛋白基因A3启动子、EGFP基因和SV40的3’末端序列,然后再顺序连接构建成质粒,第一表达框包括A3启动子、...
将上游端带有ApaI酶切粘性末端序列、下游端带有NheI酶切粘性末端序列的T4连接酶基因与上述片段连接,构建成家蚕中部丝腺生物反应器表达T4连接酶基因的质粒piggy-9887,该质粒包含的表达框序列为[A3-EGFP-SV40]-[Ser1promoter-18s rRNA promoter-FLSP-His6-DDDDK-T4Ligase-FLPA]。 上述结果说明,利用家蚕中部丝腺生物...
1.一种家蚕后部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒,其特征在于:所述的质粒为pBac[A3-EGFP-SV40]-[FL692promoter-18s rRNA-promoter-FLSP-His-DDDDK-FLPA],是以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因,包括piggyBac转座子的两个转座臂PBL和PBR以及两个转座臂之间的两个功能表达框。 2.根据权利要求1所述的一...
摘要 本发明公开了一种家蚕后部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其构建方法和应用。获得包含丝素轻链基因启动子、18srRNA基因启动子、His6序列、DDDDK、丝素轻链蛋白信号肽基因、丝素轻链基因polyA、家蚕肌动蛋白基因A3启动子、EGFP基因和SV40的3’序列,然后再构建质粒,第一表达框包括A3启动子、EGFP基因和SV4...
摘要 本发明公开了一种家蚕中部丝腺生物反应器通用型质粒及其构建方法和应用。获得丝胶蛋白1基因启动子、His6序列、DDDDK序列、丝素轻链蛋白信号肽、丝素轻链蛋白基因3’末端序列、家蚕肌动蛋白基因A3启动子、EGFP基因和SV40序列,然后再构建质粒,第一表达框包括A3启动子、EGFP基因和SV40序列,第二表达框包括丝胶蛋白1基因...
摘要 本发明公开了一种用于表达T4连接酶的家蚕后部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其应用与方法。质粒以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因,包含有作为外源基因的T4连接酶基因和作为标记基因的绿色荧光EGFP基因的功能表达框,质粒用分子生物学方法构建,且DDDDK与丝素轻链基因polyA之间含有ApaI和NheI专一性的...
摘要 本发明公开了一种用于表达T4连接酶的家蚕中部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其应用与方法。质粒以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因,包含有作为外源基因的T4连接酶基因和作为标记基因的绿色荧光EGFP基因的功能表达框,质粒用分子生物学方法构建,且DDDDK与丝素轻链基因polyA之间含有ApaI和NheI专一性的两...
摘要 本发明公开了一种用于表达T4连接酶的家蚕中部丝腺生物反应器通用型质粒及其应用与方法。质粒以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因,包含有作为外源基因的T4连接酶基因和作为标记基因的绿色荧光EGFP基因的功能表达框,质粒用分子生物学方法构建,且DDDDK与丝素轻链基因polyA之间含有ApaI和NheI专一性的两个酶切...