跑过电泳的人都知道，制胶时要根据需求选择合适的梳子。在跑RNA时，为了让电泳条带清晰整齐，我们通常选择细长的梳子如下图（图5）所示：中间的红色梳子齿宽而细，用这种梳子制出来的胶的胶孔同样细长，即使在电泳过程中RNA有些弥散，也不至于让条带粗胖粗胖的，影响美观。图5 | 不同规格的梳子 制胶 制胶是...
电泳条件:150 V,30 min。2%琼脂糖胶。Marker:2000 DNA Marker。目的片段:350 bp。 DNA Marker——琼脂糖凝胶电泳标尺 DNA Marker是分子量不同的DNA片段的组合,主要用途为DNA分子凝胶电泳时,与样品共同加入凝胶中进行电泳分离,通过样品条带与DNA Marker对应条带大小及亮度的对比,可以粗略估算样品DNA分子量的大小以及...
1. 待分离生物大分子的性质:待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和 性质都会对电泳有明显影响。一般来说,子带的电荷量越大、直径越小、形状 越接近球形,则其电泳迁移速度越快。 2. 缓冲液的性质:缓冲液的 pH 值会影响待分离生物大分子的解离程度, 从而对其带电性质产生影响,溶液 pH 值距离其等电点愈远,...
电渗值低(EEO≤0.13),条带分离效果好,分得开、跑得快; 图2.不同浓度凝胶电泳图 注:0.75%琼脂糖凝胶上样:1kb ladder,1%琼脂糖凝胶上样:100 bp ladder、1kb ladder、2000 DNA Marker、5000 DNA Marker,2%琼脂糖凝胶上样:100 bp ladder、2000 DNA Marker、5000 DNA Marker;上样量:Marker 原液 2 μl 稀释...
1、生物实验中的“跑胶”是指跑电泳。跑电泳就是用琼脂糖凝胶制作胶板从而让样品在胶板上产生电泳,所以简称“跑胶” ;分子生物学中的跑胶会出现条带,是因为带电荷的生物大分子在电泳池里的运动速度决定于该分子的分子量,所以相同分子量的生物大分子就聚集在一起形成条带,进而实现了分离纯化生物大分子的目的。
琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶,多用于 DNA、RNA 样本的电泳分离,其网状结构的疏密与琼脂糖的浓度有关。 DNA 为碱性物质,在电泳(缓冲液 pH=8)时带负电荷,在一定的电场力作用下向正极泳动,而且 DNA 链上的负电荷伴随着 DNA 分子量的增加而增加 [2]。
WB实验是基于抗原-抗体反应的原理，通过电泳将蛋白质分离，然后将分离的蛋白质与特异性抗体结合，最后通过显色反应检测蛋白质的表达和修饰。在这个过程中，任何一个环节出现问题都可能导致实验翻车。以下是几个可能导致WB实验跑电泳蛋白翻车的原因：1. 蛋白样品制备问题：蛋白样品的质量和纯度是WB实验成功的关键。如果...
2. PCR电泳无扩增条带 （1）酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活，...
跑电泳胶片的凝固时间通常为制备完成后静置20分钟至1小时。这一时间范围可确保胶片完全凝固,从而影响样品的迁移速度和分离效果。具体时间可能受胶液配制浓度、温度及硬化剂添加量等因素的影响。 跑电泳是生物化学实验中常用的一种技术,用于分离和分析DNA、RNA或蛋白质等生物大分子。其中,胶片的凝固是...
1) DNA条带跑出凝胶,减少电泳时间。 解决办法:电泳时,注意观察溴酚蓝跑到凝胶的2/3处即可停止电泳。缩短电泳时间或降低电压或增强凝胶浓度。 2)染料的激发波长使用错误,选用适合的激发波长。 例如:核酸染料YeaRed(Cat NO.10202ES, Yeasen)最大激发波长是300 nm左右,需用紫外成像仪检测。YeaRed在可见光下激发(如...