②引物设计的原则:a,PCR引物通常长18-30碱基;b,引物中的碱基尽可能随机分布,避免出现嘌呤、嘧啶的堆积现象;c,引物中G+C的含量在45-55%左右 ;d,引物自身内部不应存在互补序列以避免折叠成发夹结构;e,两个引物之间不应存在互补序列;f,引物的碱基序列不应与非扩增区域有同源性,防止非特异性扩增;g,引物3′端碱...