原位杂交探针设计原则 原位杂交探针大体可分为三类:寡核苷酸探针,cDNA探针,RNA探针。寡核苷酸探针由25bp左右的核苷酸组成,通常可以由公司合成,由于其序列较短,因此特异性较强,原位杂交时可以区分家族基因,同一基因的不同剪切体,cDNA探针长约500bp左右,可以通过非对称PCR扩增合成,由于探针式DNA,可以有效的避免降解,但...
连接入 P-GEM-T或p-GEM-TEasy载体的cdna方向决定了探针的方向。 此连接方向的话,用Nco I酶切、SP6转录酶转录的探针是反义RNA,用Sal I酶切、T7转录酶转录的探针是正义RNA。如果cDNA连接的方向相反,则探针方向也反过来。 以上便是RNA原位杂交中探针的设计原则及探针的合成过程,花这些篇幅来介绍,其重要性不言...
因为其序列较短,所以特异性较强,原位杂交时能够区分家族基因,同一基因不一样剪切体,cDNA探针长约500bp左右,能够经过非对称PCR扩增合成,因为探针式DNA,能够有效避免降解,但DNA和RNA结合不如RNA和RNA结合强,通常不采取,RNA探针长约500bp左右,经过体外转录合成,假如设计合理,其特异性是能够得到确保,其关键缺点是轻易被...
中原位杂交探针设计方法,我们可以采用RNA探针。文献中很难找到关于 RNA探针设计的原则,有的文献报道直接用cDNA合成RNA探针。借鉴爪蟾 中原位杂交探针设计流程,以小鼠FGF10的探针设计为例进行介绍。 1.在NCBI数据库中下载该FGF10的mRNA全序列,然后用FGF10的全长 在NCBI中进行BLAST比对分析,比对数据库选择mouse genome+...
原位杂交探针设计原则 原位杂交探针大体可分为三类:寡核苜酸探针,cDNA探针,RNA探针。寡核苜酸探针由25bp左右的核苜酸组成,通常可以由公司合成,由丁其序歹U较短,因此特异性较强,原位杂交时可以区分家族基因,同一基因的不同剪切体,cDNA探针长约500bp左右,可以通过非对称PCR扩增合成,由丁探针式DNA,可以有效的避免降...
1、原位杂交探针大体可分为三类:寡核甘酸探针,cDNA探针,RNA探针。寡核甘酸探针由25bp左右的核甘酸组成,通常可以由公司合成,由于其序列较 短,因此特异性较强,原位杂交时可以区分家族基因,同一基因的不同剪切 体,cDNA探针长约500bp左右,可以通过非对称 PCR扩增合成,由于探针式 DNA,可以有效的避免降解,但 DNA和RN...